Зміст
Холодний спирт використовується для відділення ДНК від розчинів на водній основі, що дозволяє очистити його для подальшого генетичного тестування. Додавання спирту до розчину, що містить ДНК, є простим способом зробити його чистим при більш низьких температурах і уповільнити ферменти, які його розкладають, даючи кращі результати вилучення.
Розрив стін
Процедури екстракції для отримання чистої ДНК повинні позбутися всіх молекулярних і хімічних компонентів тканини, з якої витягується ДНК. Перші кроки включають руйнування клітинних стінок. Це може бути зроблено з різними хімічними агентами, які є їдкими до клітинних мембран, але не пошкоджують ДНК. Клітини також можуть бути ультразвуковими, гомогенізованими або розмеленими для руйнування мембран.
Видалення ліпідів
Як тільки клітинні стінки руйнуються, додається миючий засіб, щоб позбутися від жирів і масел, які складають мембрани клітин. Миючі засоби викликають розчинення масел і жирів у розчині.
Видалення білків
Білки і ферменти можуть бути перетравлені шляхом додавання протеази до розчину. Протеази розщеплюють білки на дрібні пептиди і амінокислоти.
Осаджують ДНК
Додавання крижаного спирту до розчину буде осідати і агрегувати ДНК. Генетичний матеріал може бути зібраний шляхом центрифугування зразка і декантації рідкого шару. Вона повинна існувати як невеликий осад на дні центрифужної трубки.
Очищає ДНК
ДНК можна промити шляхом повторного суспендування в холодному спиртовому розчині і повторно центрифугувати кілька разів для отримання дуже чистого зразка. Типові використовувані спирти включають етанол і ізопропанол. Цей процес залишає дуже чистий зразок у строгих тестах.
