Зміст

• Інструкції
• Відновлення стовпця
• Як
• Повідомлення
• Що вам потрібно

Високоефективна рідинна хроматографія (ВЕРХ) є звичайним методом лабораторного аналізу, в якому зразок розділяється на його хімічні компоненти, коли він проходить через колонку. Цю колонку заповнюють пористим матеріалом, типово силікагелем. Стандартний стовп із зворотною фазою, як і С8, іноді може засмітитися або забруднитися. Ці стовпці можна отримати за допомогою дуже простих методів.

Інструкції

Правий розчинник може відновити брудну колонку (Jupiterimages / liquidlibrary / Getty Images)

Відновлення стовпця

1. Відключіть стовпчик і поверніть його положення так, щоб рухома фаза тепер проходила через те, що зазвичай виводиться на колонку. Приєднайте розетку до іншого кінця стовпця (який був початковий запис), і дайте йому зійти в розряд.

2. Насосить ряд розчинників в порядку зменшення полярності. Рекомендована основна серія починається з метанолу, потім перемикається на ацетонітрил, потім ацетонітрил / ізопропанол (75:25), ізопропанол, метиленхлорид і гексан. Якщо рухома фаза, яка була в колонці, була абсорбентною, рекомендується проходити з водою раніше в метанолі. Потік від одного до двох мілілітрів на хвилину є достатнім, і приблизно десять об'ємних стовпчиків кожного розчинника повинні бути перекачані. Об'ємна колонка є внутрішнім простором колонки і обчислюється за допомогою (0.7 x pi x (DI / 2) ^ 2 x L), де DI - внутрішній діаметр стовпця, а L - довжина.

   
   

3. Насосіть ще десять обсягів ізопропанолу через колонку, щоб підготувати його для використання з вихідною рухомою фазою. Якщо початкова рухома фаза була пом'якшена, також прокачували воду через колонку після ізопропанолу, перед поверненням до вихідної рухомої фази.

4. Відключіть стовп, поверніть його назад і знову ввімкніть, щоб він знаходився у вихідному положенні (так, щоб рухома фаза входила в праву сторону колони). Повторно підключіть висновок динаміка до детектора.

Як

• Якщо цей процес не ретельно очищає колонку, можна використовувати суміш 50:50 диметилсульфоксиду (DMSO) і диметилформамід (DMF). Залишки білків і іонів металів можуть вимагати інших типів розчинників, таких як іоннозберігаючі реагенти або розчин етилендіаміну тетра-оцтової кислоти (ЕДТА).

Повідомлення

• У деяких приладах хребет має грубе металеве сито як вхідний отвір. У цьому випадку повернення стовпчика дозволить стаціонарній фазі залишити колонку, і це не рекомендується. Якщо ви не впевнені, зверніться до вашого дилера.
• Розчинник, який використовується в цьому процесі, є потенційно токсичним при попаданні в організм і вдиханні. Використовуйте звичайні лабораторні запобіжні заходи під час роботи.

Що вам потрібно

• Пристрій ВЕРХ
• Вода
• Метанол
• Ацетонітрил
• Ізопропанол
• Метиленхлорид
• Гексан