Зміст
Дослідження з мікробними культурами часто вимагають ідентифікації присутніх в них організмів. Коли невелику порцію культури вводять на агар, що містить живильне середовище, можна розділити масу бактерій на окремі колонієутворюючі одиниці. Кожна з цих одиниць розвивається в окремих колоніях, які мають характеристики, які допомагають ідентифікувати організм.
Призначення
Мікробіологічні дослідження вимагають вивчення морфології певних організмів. У деяких випадках організми, які присутні в змішаній культурі, повинні бути відокремлені, перш ніж їх можна буде аналізувати. Таким чином, важливо ізолювати ці мікробні колонії. Культури бактерій містять велику кількість клітин в одній краплі. Посів шляхом виснаження на агаровій пластині їх розбавляє, так що одна бактеріальна клітина осідає у певній ділянці пластини. Деякі з цих окремих клітин розділені між собою на кілька міліметрів. Кожен з них ділиться, утворюючи тисячі нових клітин, даючи початок ізольованим колоніям.
Принцип
Агарова пластина забезпечує середовище, багате поживними речовинами, що стимулює ріст і розмноження мікроорганізмів. Посів стічних вод застосовує метод просіювання квадранту, при якому вся плита розділена на чотири квадранти. При переході з одного квадранта в інший відбувається поступове розрідження вихідної культури по всій доступній поверхні. Квадрант, з якого ви починаєте, демонструє щільний і нерозрізнений мікробний ріст, який виглядає як килим мікроорганізмів, тоді як останній показує ізольовані колонії.
Матеріали
Для висіву на вихлоп потрібні поживні агарові пластини, петля для щеплення, посів бактерій, дезінфікуючий розчин, такий як лізол 10%, і пальник Бунзена. Вам також знадобляться засоби безпеки, такі як фартух, рукавички та захисні окуляри. Інокулюм для утворення розтяжок виготовляється з культури бактерій за допомогою петлі та подряпин поживних агарових пластин. Пальник Бунзена призначений для розпалювання ручки під час пазів. Перед початком експерименту очистіть поверхню дезінфікуючим розчином.
Метод
Використовуйте невелику кількість посівного матеріалу для посіву в перший квадрант рухами вперед і назад. Запаліть ручку і дайте їй охолонути, торкаючись її до частини агарової пластини, яка не була щеплена. Доторкніться до одного кінця площі, яку ви щойно засіяли, і протягніть її звідти до другого квадранта. Знову запаліть і охолодіть петлю, а з другої області опрацюйте третій квадрант. Повторіть той самий процес із четвертим квадрантом.