Зміст

• Кращий перегляд
• Ідентифікація та класифікація
• Техніко-економічне обґрунтування
• Ідентифікація клітинних структур

Мікробіологи вивчають характеристики мікроорганізмів, таких як водорості, бактерії, найпростіші, гриби та віруси, за допомогою мікроскопа. Хоча деякі організми, такі як найпростіші та дріжджові клітини, легко побачити через предметні стекла, клітини бактерій вимагають фарбування. Вчені розробили кілька методів, таких як техніка фарбування за Грамом, кислотостійке фарбування та флуоресцентне фарбування для поліпшення візуалізації бактеріальних клітин та клітинних структур. Використовуючи такі методи фарбування, можна виявити структурні характеристики, які допомагають класифікувати бактерії.

Кращий перегляд

Бактеріальні організми настільки малі, що більшість з них видно лише під мікроскопом із силою збільшення в 1000 разів. Однак просто збільшення розміру не забезпечує достатнього ступеня чіткості, тому бактерії перед спостереженням повинні бути забарвлені, щоб забезпечити чіткість, необхідну для візуалізації.

Ідентифікація та класифікація

Фарбування бактерій для розрізнення видів бактерій відоме як диференціальне фарбування. Грам-пляма - це диференціальна пляма, яка розрізняє бактерії залежно від вмісту клітинної стінки. У цьому методі бактеріальні клітини реагують з кристалічно-фіолетовим барвником, перетворюючись у фіолетовий. Завдяки додаванню відбілюючого агента деякі бактеріальні клітини втрачають свій колір, а інші - ні. Завдяки додаванню сафранінового барвника знебарвлені клітини стають червоними, тоді як бактеріальні клітини, які не втрачають колір, залишаються фіолетовими. Клітини, які червоніють, називаються грамнегативними організмами, а клітини, які не червоніють, класифікуються як грампозитивні організми. Техніка фарбування за Грамом забезпечує швидкий метод первинної ідентифікації бактерій, які беруть участь в інфекціях. Так само кислотостійкий процес фарбування допомагає конкретно ідентифікувати організми, що належать до класу бактерій, званих мікобактеріями, таких як Mycobacterium tuberculosis.

Техніко-економічне обґрунтування

У зразках бактеріальних культур часто важливо виявити наявність живих бактеріальних клітин. Такі методи, як флуоресцентне фарбування, допомагають визначити, чи є культивуючі клітини життєздатними чи ні. Живі бактерії мають здатність перетворювати 5-ціано-2,3-дитолілхлорид тетразолію (ЦТК) у барвник, який виявляє червону флуоресценцію. Отже, коли культури кольору CTC випромінюють ці флуоресценції, це свідчить про наявність життєздатних бактерій. Йодид пропідію - пляма, яка діє лише на неживі клітини, які пошкодили мембрани, і тому корисна для виявлення мертвих бактеріальних клітин.

Ідентифікація клітинних структур

Фарбування забезпечує метод чіткої візуалізації різних клітинних структур. Наприклад, метод фарбування Фейльгена дозволяє ідентифікувати ядро ​​всередині бактеріальних клітин, тоді як фарбування Альберта корисно для візуалізації метахроматичних гранул. Аналогічно, техніка просочення сріблом дозволяє ідентифікувати спірохети. Джгутики легко спостерігати, коли вони забарвлюються фарбою Рю. Малахітове зелене забарвлення допомагає виявити спори бактерій.