Зміст

• Краща візуалізація
• Ідентифікація та класифікація
• Визначення доцільності
• Ідентифікація клітинних структур

Мікробіологи вивчають характеристики мікроорганізмів, таких як водорості, бактерії, найпростіші, гриби і віруси, за допомогою мікроскопа. Хоча деякі організми, такі як найпростіші і дріжджові клітини, легко помітити через слайди, бактеріальні клітини потребують фарбування. Вчені розробили ряд методів, таких як метод фарбування за Грамом, кислотно-швидке фарбування і флуоресцентне фарбування для поліпшення візуалізації бактеріальних клітин і клітинних структур. Використовуючи такі методи фарбування, можна визначити структурні характеристики, які допомагають класифікувати бактерії.

Метод фарбування допомагає поліпшити візуалізацію бактерій (Дункан Сміт / Stockbyte / Getty Images)

Краща візуалізація

Бактеріальні організми настільки малі, що більшість з них видно тільки під мікроскопом з потужністю збільшення в 1000 разів. Проте просте розширення не забезпечує достатнього ступеня ясності, тому бактерії повинні бути пофарбовані до спостереження, щоб забезпечити ясність, необхідну для візуалізації.

Ідентифікація та класифікація

Фарбування бактерій для розрізнення типів бактерій відоме як диференційне фарбування. Фарбування за Грамом є диференційним фарбуванням, що відрізняє бактерії як функцію вмісту клітинної стінки. У цьому методі бактеріальні клітини реагують з кристалічним фіолетовим барвником для перетворення фіолетового. При додаванні агента знебарвлення деякі бактеріальні клітини втрачають забарвлення, інші - не. Додаючи барвник сафранину, знебарвлені клітини набувають червоне фарбування, тоді як клітини бактерій, які не втрачають колір, залишаються фіолетовими. Червоні клітини називаються грамнегативними організмами, а ті, які не стають червоними, класифікуються як грампозитивні організми. Метод фарбування за Грамом забезпечує швидкий метод первинної ідентифікації бактерій, що беруть участь у інфекціях. Аналогічно, кислотостійкий процес фарбування допомагає конкретно ідентифікувати організми, що належать до класу бактерій, що називаються мікобактеріями, такими як Mycobacterium tuberculosis.

Визначення доцільності

У зразках бактеріальної культури часто важливо виявити наявність живих бактеріальних клітин. Такі способи, як флуоресцентне фарбування, допомагають визначити, чи є клітини культури життєздатними чи ні. Живі бактерії мають здатність перетворювати 5-ціано-2,3-дитоліл (СТС) тетразолію хлориду в барвник, який показує червону флуоресценцію. Отже, коли культури, забарвлені CTC, виділяють ці флуоресценції, це свідчить про наявність життєздатних бактерій. Йодид пропідію - це фарбування, яке діє тільки на неживі клітини, які мають пошкоджені мембрани і тому корисні для ідентифікації мертвих бактеріальних клітин.

Ідентифікація клітинних структур

Забарвлення забезпечує чіткий метод візуалізації для різних структур клітин. Наприклад, метод фарбування Фейлгена дозволяє ідентифікувати ядро ​​всередині бактеріальних клітин, тоді як фарбування Альберта корисно для візуалізації метахроматичних гранул. Крім того, техніка просочення сріблом дозволяє ідентифікувати спірохети. Жгутики легко помітити, коли вони забарвлені забарвленням Рю. Малахітове зелене забарвлення допомагає виявити бактеріальні спори.