Зміст
Високоефективна рідинна хроматографія (ВЕРХ) - це інструмент, який використовується для відділення речовин від суміші. Виділення та ідентифікація певних хімічних речовин відбувається головним чином у хроматографічній колонці системи. Багато типів стовпців доступні для CLAE, і кожен використовується для певного типу аналізу. Стовпець С18 є найсильнішим неполярним, як правило, використовуваним. Після тривалого використання протягом тривалого періоду часу витрата розчинника через нього зменшується, а час аналізу збільшується. Іншою причиною зменшення часу аналізу є наявність зразків, які залишають невелику кількість хімічних речовин у матеріалі колони, зменшуючи здатність їх відокремлювати. Відновлення його поверхні може бути здійснено шляхом обробки матеріалу низкою специфічних розчинників, щоб очистити його від залишків зразків та оживити підтримуючий матеріал.
Крок 1
Зніміть колону C18 із напрямку потоку та розмістіть її у зворотному напрямку. Повернення розчинника через нього пом'якшить ефект накопичення, який виникає з часом. Потрібно стежити за тим, щоб в кінці колони не залишалося занадто багато накопиченого матеріалу. Деякі фабрики використовують більшу сітку вгорі, щоб, коли потік змінює напрямок, сітка знаходилася в нижньому положенні. Цей спосіб відновлення називається зворотним потоком. Щоб запобігти надходженню накопичення до системного детектора та, можливо, викликаючи перешкоду, дозвольте йому функціонувати без підключеного детектора та направляйте потік з колони на утилізацію.
Крок 2
Помістіть пробірку для пропускання розчинника в серію розчинників, щоб елюювати будь-яку сполуку, що утримується в колонці, у зворотному напрямку. Ці розчинники розрізняються за своїми гідрофільними характеристиками. Змінюючи їх, ви будете елюювати сполуки однаково різноманітної гідрофільної природи. Використовуйте послідовно по 50 мл кожного з наступних розчинників: води (якщо ви використовуєте буфер), метанолу, ізопропанолу, дихлорметану, гексану, дихлорметану та ізопропанолу.
Крок 3
Замініть колонку в правильному напрямку і зробіть, щоб через неї протікав розчинник Використовуйте не менше 75 мл для промивання, перш ніж продовжувати. Перевірте його за зразком, який ви використовували, коли він був новим, і перевірте результати. Зверніть увагу, коли досягаєте максимальних точок утримання та загального часу аналізу. Ступінь відповідності цих атрибутів початковому тесту, коли він був ще новим, вказуватиме ступінь відновлення стовпця. Якщо результати не задовільні, замініть стовпець новим, а старий викиньте.
